馬里奧(克里斯·帕拉特 Chris Pratt 配音)和路易吉(查理·戴 Charlie Day 飾)是生活在布魯克林的兩名水管工,他們剛剛成立了自己的小公司,但很顯然,他們的家人并不完全支持兄弟兩人的這份事業(yè)。某日,在工作中,馬里奧和路易吉被水管吸入到了一個光怪陸離的世界之中,兩人在旅途中被迫分開,馬里奧來到了由桃花公主(安雅·泰勒-喬伊 Anya Taylor-Joy 配音)統(tǒng)治的蘑菇國,而路易吉則不幸的被傳送到了由酷霸王(杰克·布萊克 Jack Black 配音)統(tǒng)治的庫巴國。 此時,酷霸王正準備大舉進攻蘑菇國,擄走公主并和她結(jié)婚,在這個節(jié)骨眼上,馬里奧的出現(xiàn)帶給了桃花公主希望,她帶著瑪麗奧來到了叢林王國,請求那里的國王和王子(塞斯·羅根 Seth Aaron Rogen 飾)的支援。